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體外染色體畸變試驗試劑盒-含細胞

簡要描述:體外染色體畸變試劑盒省去陽性底物成分準備、誘導 S9 制備,可以直接使用,大大縮短了實驗周期;試劑盒各成分均經過嚴格的質量檢測,無雜菌污染,誘導 S9 活性均符合染色體畸變試驗要求,實驗結果準確、可靠、重現性高。染色體畸變試驗試劑盒應用廣泛,可進行食品、化學品、農藥、消毒劑、食品添加劑、藥物殘留、化妝品、容器與包裝材料等多個方面的遺傳毒理學檢測。

  • 產品型號:221011
  • 廠商性質:生產廠家
  • 更新時間:2021-01-12
  • 訪  問  量:837

詳細介紹

品牌IPHASECAS
分子式純度
分子量貨號221011
規格5mL×20 體系/盒供貨周期現貨
主要用途遺傳毒性試驗,體外染色體畸變試驗應用領域醫療衛生,生物產業,制藥

體外染色體畸變試驗
體外染色體畸變試驗的目的是檢測培養的哺乳動物細胞染色體結構畸變。結構畸變可份為染色體型和染色單體型。大多數化學致突變物誘導染色單體型突變,但染色體型突都也可發生。多倍體增加表明受試物可導致染色體數目畸變。但是,本方法不用于檢測數目畸變。染色體突變和相關事件可以引起很多人類遺傳性疾病,并且有證據表明,引起體胡魔癌基因和抑癌基因改變的染色體突變以及相關事件,與人類和實驗動物的腫瘤發生有關。體外柴色體畸變試驗可應用于已建立的細胞系、細胞株或原代細胞培養,根據培養生長能力、核型的穩定性、染色體數目、染色體差異以及染色體響變的自發頻率選擇合適的細胞。

體外染色體畸變試劑盒 
IPHASE in vitro mammalian chromosome aberration test kit (CHL)
北京匯智泰康醫藥技術有限公司針對染色體畸變試驗開發染色體畸變試驗試劑盒, 本試劑盒省去了陽性底物成分準備、誘導 S9 制備,可以直接使用,大大縮短了實驗周期;試劑盒各成分均經過嚴格的質量檢測,無雜菌污染,誘導 S9 活性均符合染色體畸變試驗要求,實驗結果準確、可靠、重現性高。染色體畸變試驗試劑盒應用廣泛,可進行食品、化學品、農藥、消毒劑、食品添加劑、藥物殘留、化妝品、容器與包裝材料等多個方面的遺傳毒理學檢測。

體外染色體畸變試劑盒使用說明書
【試驗原理】
    在加入和不加入代謝活化系統的條件下,使培養的哺乳類動物細胞暴露于受試物中,用中期分裂相阻斷劑秋水仙素進行處理,使細胞停止在中期分裂相,隨后收獲細胞、制片、染色并分析受試物是否誘發體外培養的哺乳類細胞染色體畸變,從而評價受試物致突變的可能性。
【產品組成】

組分 規格 數量 使用說明 保存條件
S9復合物 2mL 1 / -70℃
磷酸鹽緩沖液 10 mL 1 使用前混勻
環磷酰胺(CP) 0.5 mL 1 800 μg/mL,使用前混勻
四列毒C(MMC) 0.5mL 2 20 μg/mL,使用前混勻
秋水仙素 1.5 mL 1 20 μg/mL,使用前混勻
中國倉鼠肺細胞(CHL) 1 mL 1 /

【產品使用說明】
1、細胞復蘇
從-70冰箱取出細胞,于37℃水浴融化,1000rpm離心5min,棄上清,用含10%牛血清RPMI 1640培養液(RPMI-10)中重懸細胞;1000rpm再次離心5min,棄上清,用RPMI-10重懸后接種于細胞瓶中培養。
2、細胞準備
將處于對數生長期,貼壁生長良好的CHL細胞用0.25 %胰蛋白酶( Trypsin-EDTA)消化處理制成細胞懸液,5 mL/瓶接種于25cm2細胞培養瓶中,于37℃、5%二氧化碳培養箱中加濕培養約24 h-48h。
3、染毒處理
吸去培養瓶中培養液,加入一定濃度的受試物、S9混合液(不加S9混合液時,需用培養液補足)以及一定量不含血清的培養液,于培養箱中處理6h。在收獲細胞前4 h加入細胞分裂中期阻斷劑秋水仙素溶液(終濃度為0.2 mg/mL)。具體試驗方案見下表:
1)S9混合液配制

S9混合液配制(10mL)
S9復合物 1.6mL 現配現用。使用過程中,于冰浴條件下保存。
試驗結束后,剩余溶液應丟棄,不可重復使用。
磷酸鹽緩沖液 8.4mL

2)推薦染毒培養體系配制方案(以3個受試物劑量組為例)

處理方式 組別 培養液體積(mL) S9混合液體積(mL) 受試物體積(mL) 溶劑體積(mL) 陽性對照體積(mL)
CP MMC
活化 陽性對照 4.45 0.5 / / 0.05 /
劑量1 4.45 0.5 0.05 / / /
劑量2 4.45 0.5 0.05 / / /
劑量3 4.45 0.5 0.05 / / /
溶劑對照 4.45 0.5 / 0.05 / /
不活化 陽性對照 4.95 / / / / 0.05
劑量1 4.95 / 0.05 / / /
劑量2 4.95 / 0.05 / / /
劑量3 4.95 / 0.05 / / /
溶劑對照 4.95 / / 0.05 / /

注:24小時染毒所用陽性底物需稀釋2倍后加入0.05 mL。
4、收獲細胞及制片
用0.25%的胰蛋白酶溶液消化細胞,加入0.075mol/路化甲溶液進行低滲處理,固定液(甲醇:斌戳酸=3:1)進行固定并滴片,用吉姆薩染液染色,中性樹膠封片,并于油鏡下進行閱片,記錄畸變細胞的坐標位置及畸變類型,具體操作方法參照國標方法進行。
5、畸變類型分析及結果判定
結果分析及判定可參照:473 體外哺乳動物細胞染色體畸變試驗,《化學品測試方法·健康效應卷》(第二版),2013年,(ISBN:978-7-5111-1476-1)。
【注意事項】
1.實驗前請自行準備RPMI 1640培養液、牛血清、細胞培養瓶、24孔細胞培養板、滅菌槍頭、無菌移液管、二氧化碳培養箱、振蕩器、15、50mL離心管等,所有耗材需做無菌處理。
2.實驗操作應在符合細胞培養實驗要求的環境下進行。

匯智泰康是一家位于中美兩地的生物醫藥合同研發機構,整合中美兩地的藥物研發技術服務平臺,基于AAALAC、GLP、ISO/IEC 17025實驗室認證,面向很多企業及研發機構提供分析化學、DMPK、藥理藥效、生物學、以及毒理安全性評價產品與服務。

主要產品:
體外藥物代謝產品
Ⅰ相代謝穩定性試劑盒
Ⅱ相代謝穩定性試劑盒
CYP450酶代謝表型研究試劑盒
不同種屬肝微粒體,肝S9
重組酶,標準品,孵育系統等
 
遺傳毒性產品
Ames試劑盒
體外染色體畸變試驗試劑盒
TK基因突變試驗試劑盒
HPGRT基因突變試劑盒
彗星試驗試劑盒
誘導大鼠肝S9等
 
空白生物基質
空白血清:食蟹猴,恒河猴,比格犬,大鼠,小鼠,豬,兔
空白血漿:食蟹猴,恒河猴,比格犬,大鼠,小鼠,豬,兔
空白血:食蟹猴,恒河猴,比格犬,大鼠,小鼠,豬,兔
空白尿液:食蟹猴,恒河猴,比格犬,大鼠,小鼠


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